賽默飛世爾

液相色譜方法UHPLC：Thermo Scientific Ultimate 3000 RSLC
色譜柱：Thermo Scientific Hypersil Gold (50*2.1mm，1.9 μm）
流速：0.3 mL/min，進樣體積：5 μL
流動相：A 相：2mM 的甲酸銨和 20 μL/ L 的甲酸水溶液 B 相：2mM 的甲酸銨和 20 μL/ L 的甲酸甲醇溶液
梯度洗脫：

質(zhì)譜方法質(zhì)譜儀：Thermo Scientific Q Exactive Focus臺式高分辨質(zhì)譜儀。 實驗采用正負切換 Full MS-ddMS 2 掃描方式進行篩查分析，采 用正離子或負離子模式的 Full MS-ddMS 2 和 t-SIM- ddMS 2 進行定量分析，如圖 1 所示。利用數(shù)據(jù)依賴掃描獲得的二級子離子 碎片離子信息進行確證。
Full MS：分辨率為 70,000（FMHW@m/z 200）。
t-SIM：分辨率為 70,000（FMHW@m/z 200），isolation width 為 4 m/z
MS/MS 采集：17,500（FMHW@m/z 200）分辨率下數(shù)據(jù)依賴
采集；HCD NCE 為 45%，isolation width 為 4m/z

樣品前處理方法參考文獻 [1]，樣品經(jīng) 1% 的甲酸乙腈 / 水溶液浸提 15min 后，再震搖 1h 后，離心，過濾，供測定分析。

實驗與討論 在一定的 Mass tolerance 下，采用化合物加合離子峰的準確 質(zhì)量數(shù)從 Fullscan 的數(shù)據(jù)中提取，獲得 XIC 圖譜。Q Exactive Focus 具有良好的質(zhì)量精度，因此可以將提取窗口縮小至 5ppm，甚至更低，充分保證了方法極高的選擇性。同時，Q Exactive Focus 可以實現(xiàn)快速的正負離子切換掃描，并在正負 切換的模式下保證高質(zhì)量精度，在提高篩查實驗通量同時，也 保證結(jié)果的準確（圖 3）。詳情請點擊查看更多